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负载热穿透试验：试验方法：待灭菌物每一品种、每一规格中的每一种装载组合方式中编号放置热电偶，分别进行3次灭菌操作，还应做至大与至小装载方式试验，判断标准：各种组合方式的被灭菌物中，各测点受热温度FHgt;=121C(按冷点温差校正后温度)，持续时间30分钟以上，此时，应有F0gt;6蒸汽灭菌程序的验证内容：灭菌设备构造、组成部分功能、辅助系统概述、设备运行控制系统、记录系统。


湿热灭菌原理：使微生物中类蛋白质及酶变性和凝固。标准灭菌时间：FO，基本要求：--设备升温、降温速度符合要求；--应有空载热分布试验、负载热穿透试验和***挑战三个必要试验。四、空载热分布试验：方法：将热电偶编号安置于灭菌机内制***置，按121C，15分钟的灭菌程序操作，连续进行3次，确定灭菌室内冷点，判断标准：各测点温度达到121C，尤冷点与各测点平均温差不超过土2.5C为合格。


进入无菌室的准备：消毒处理无菌室；对所有器材、被检样品进行处理进入无菌室；洗手消毒首先用肥皂涂在手上揉搓10-15s肥皂虽不杀菌但有去污作用，然后用流水彻底冲洗，可有效除去手上大多数暂住菌，再用消毒液洗手，如洗必泰、苯扎铵、碘伏、乙醇、等。操作人员将手部消毒后再穿无菌服。在进入无菌室后，进一步用浸有消毒液的棉球消毒手。